食品和飼料中三聚氰胺檢測(cè)方法有哪些？
2.5高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析法(HPLC-MSMS)
液質(zhì)聯(lián)用法與高效液相色譜法一樣，也不需要進(jìn)行衍生化，與液相色譜法相比，具有高靈敏度和高選擇性的特點(diǎn)，適合于濃度相對(duì)較低的樣品中三聚氰胺的分析，質(zhì)譜或二級(jí)質(zhì)譜作為確證手段。此法需要對(duì)質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，使用較多的儀器是Agilent公司的HP1100高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。常用的流動(dòng)相為含有醋酸銨的水或乙腈溶液和甲醇或乙腈，質(zhì)譜的檢測(cè)方式為多反應(yīng)選擇監(jiān)測(cè)(MRM)模式。該方法簡(jiǎn)單快速、抗干擾能力強(qiáng)、檢出限低、重復(fù)性好、定性可靠、定量準(zhǔn)確，經(jīng)大量樣品實(shí)際檢測(cè)證明，該方法適合于生產(chǎn)過程的監(jiān)控和進(jìn)出口把關(guān)檢測(cè)的高靈敏度確證和定量分析。丁濤等利用HPLC-DAD進(jìn)行樣品中三聚氰胺的初篩，利用HPLC-MS-MS進(jìn)行確證。HPLCDAD的檢測(cè)低限為10mg/kg，HPLC-MS-MS的檢測(cè)低限為0.5mg/kg;HPLC-DAD的添加回收率為76%～88%，HPLC-MS-MS的添加回收率為72%～82%(基質(zhì)匹配曲線校正)，2種方法的添加回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.4%～6.4%。張林田等針對(duì)不同食品采用不同的前處理__方法，采用C18、SCX陽(yáng)離子(質(zhì)量比為4:1)混合填料質(zhì)譜柱分離，pH3.5的10mmol/L乙酸銨溶液與乙腈以體積比40:60混合的溶液為流動(dòng)相，串聯(lián)質(zhì)譜電噴霧離子源(ESI)正離子模式檢測(cè)，外標(biāo)法定量，測(cè)得三聚氰胺質(zhì)量濃度在50g/L以內(nèi)呈線性，測(cè)定下限為10g/kg。
2.6氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法與高效液相色譜法相比可降低假陽(yáng)性率，提高準(zhǔn)確度，起確證、定量的作用。此法需要硅烷化衍生，雖然步驟較繁瑣費(fèi)時(shí)，但起到了有效地去除基質(zhì)干擾的作用，靈敏度高，方法穩(wěn)定。李東剛等建立了三重四極桿氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析乳粉中三聚氰酸和三聚氰胺的方法。樣品以甲醇提取，利用衍生化試劑BSTFATMCS(99:1，v/v)進(jìn)行衍生化處理，該方法在0.010～0.500mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，三聚氰酸和三聚氰胺的檢測(cè)限分別為0.016、0.003mg/kg，精密度為4.5%～8.6%、3.9%～6.2%，回收率分別為84.0%～102.0%、88.5%～104.0%。賀利民等建立了基于分子印跡固相萃取氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定雞蛋中三聚氰胺的確證方法，采用本體聚合法合成了對(duì)三聚氰胺具有良好交叉識(shí)別能力的分子印跡聚合物，將其制備成固相萃取小柱，可有效分離、凈化和富集雞蛋中的三聚氰胺，在25.0～500ng/mL濃度范圍內(nèi)，線性良好(r>0.99)，在50、500、1000g/kg添加水平，雞蛋中三聚氰胺的平均回收率分別為82.5%、84.5%及81.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%，以3倍信噪(S/N)比計(jì)算，方法檢出限(LOD)達(dá)10g/kg。邵德佳等將飼料用三氯乙酸和乙酸鉛溶液提取，再經(jīng)PCX固相萃取柱凈化、BSTFA衍生化，定容后用氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定，并以同位素內(nèi)標(biāo)定量。飼料中三聚氰胺的檢出限為50μg/kg，三聚氰胺的測(cè)定在125～5000ng/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，配合飼料、濃縮飼料、預(yù)混飼料中的平均回收率分別為95.0%、95.6%、94.9%。
2.7近紅外吸收檢測(cè)法
氰胺類化學(xué)物雖然含有與蛋白質(zhì)相同的氮元素，但由于分子結(jié)構(gòu)完全不同，因此其分子結(jié)構(gòu)的分子振動(dòng)信息也就不可能一致。三聚氰胺在指紋吸收區(qū)域具有多個(gè)典型的吸收峰，根據(jù)這些特征吸收我們就可以對(duì)其進(jìn)行定量和定性判別分析。該法具備無損、高效、快速、成本低、綠色環(huán)保和易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等特點(diǎn)，利用近紅外光譜分析方法測(cè)量食品特別是乳制品中的三聚氰胺含量可以克服傳統(tǒng)方法的諸多弊端，是牛奶質(zhì)量檢測(cè)的理想方式。劉景旺等使用英國(guó)PeikinElmer公司的SpectrumGX1系列傅里葉變換型紅外光譜儀，通過儀器配套的軟件Spectrum控制研究了三聚氰胺在乳制品的中紅外和近紅外吸收光譜數(shù)據(jù)，得到結(jié)論：可以通過觀測(cè)三聚氰胺在近紅外波段的特征譜線實(shí)現(xiàn)其在乳制品中的定性檢測(cè)。劉小莉等采用傅利葉變換近紅外光譜儀研究得出當(dāng)飼用魚粉中摻入三聚氰胺量在0.1%～15.0%時(shí)，6873.4～6514.7cm-1可作為定性鑒定飼用魚粉是否摻雜三聚氰胺的特征譜峰，識(shí)別率為96.5%。同時(shí)，所建立的定量分析模型，可檢測(cè)出三聚氰胺的含量，最低檢測(cè)限為0.1%。
2.8毛細(xì)管電泳法
毛細(xì)管電泳是一種無需采用有機(jī)溶劑、經(jīng)濟(jì)高效的分離分析方法，目前已廣泛應(yīng)用于多種藥物制劑、蛋白質(zhì)及食品的分析檢測(cè)中。李志偉等采用高效毛細(xì)管電泳建立奶制品中三聚氰胺的含量測(cè)定方法，以30mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH5.0)為電泳介質(zhì)，未涂層石英毛細(xì)管(75μm×78cm，有效長(zhǎng)度70cm)為分離通道，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)240nm，分離電壓10kV。三聚氰胺在10.0～50.0μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9992，平均加標(biāo)回收率為97.04%。饒欽雄等建立了高效毛細(xì)管電泳-二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)雞蛋中三聚氰胺的方法。樣品用三氯乙酸提取，固相萃取小柱凈化處理后進(jìn)行檢測(cè)，以50mmol/L甲酸250mmol/L甲酸銨(pH2.5)為緩沖溶液，在總長(zhǎng)度為58.5cm、內(nèi)徑為75μm的毛細(xì)管中，分離時(shí)間約6min，測(cè)得的定量限為0.25mg/kg。三聚氰胺濃度在0.25～5.0mg/kg范圍內(nèi)進(jìn)行添加回收實(shí)驗(yàn)，平均回收率為80.2%～90.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.7%～3.4%。
2008年三鹿等品牌的奶制品被爆出添加三聚氰胺后，消費(fèi)者對(duì)整個(gè)中國(guó)奶制品市場(chǎng)的質(zhì)量信任度達(dá)到最低谷。經(jīng)過近一年的時(shí)間，事件剛剛有所平息，2009年年底，上海市食品安全聯(lián)席會(huì)議辦公室發(fā)布了“上海熊貓乳品有限公司因涉嫌生產(chǎn)、銷售三聚氰胺超過國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的乳制品，被監(jiān)管部門依法查處”的消息，公眾再次感受到三聚氰胺的威脅。三聚氰胺的幾種檢測(cè)方法各有千秋，也基本能滿足實(shí)驗(yàn)室對(duì)三聚氰胺日常檢測(cè)的需要。不同的檢測(cè)方法具有不同的檢測(cè)極限，適用于不同的檢測(cè)領(lǐng)域。實(shí)際應(yīng)用中要根據(jù)樣品性質(zhì)及檢測(cè)要求選擇提取和測(cè)定方法。隨著分析方法和技術(shù)的不斷完善和發(fā)展，相信會(huì)有更快速簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度和靈敏度更高的方法出現(xiàn)，這對(duì)于食品和飼料的安全性有著十分重要的作用。
