白菜是我國栽培蔬菜中分布最廣、種植面積最大的蔬菜作物,在白菜(白菜人才)的種植過程中,常遭受病毒病、霜霉病、軟腐病、黑斑病和黑腐病等病菌的侵染,如一些品種的抗病性較差,致使產(chǎn)量下降,局部甚至絕產(chǎn)絕收。白菜黑斑病是葉部常見病害之一,全國各地分布廣泛。以春秋兩季發(fā)生普遍,病害嚴(yán)重除造成減產(chǎn)外,莖葉變苦,品質(zhì)下降,種株染病不僅影響種子產(chǎn)量,還可使種子帶菌。該文主要從大白菜黑斑病的病原研究、抗性鑒定、抗性遺傳規(guī)律等方面進(jìn)行概述,以期為該病害的相關(guān)研究工作提供借鑒。
1 黑斑病病原的相關(guān)研究
白菜黑斑。ㄦ湼矜邔貯lternaria)由鏈格孢屬真菌引起,包括蕓薹鏈格孢Alternaria brassicae,甘藍(lán)鏈格孢A.brassicicola 和蘿卜鏈格孢A.japonica 3個種,其中秋冬白菜黑斑病一般由蕓薹鏈格孢引起,通過蔬菜種子及雜草和植株殘體等途徑傳播危害白菜生產(chǎn)。黑斑病菌傳統(tǒng)分類的主要依據(jù)是分生孢子和喙的形態(tài)。李明遠(yuǎn)等對蘿卜鏈格孢形態(tài)、培養(yǎng)性狀、病原菌侵染和田間癥狀等進(jìn)行了觀察,并對白菜上的3 種鏈格孢和細(xì)交鏈格孢作了對比分析,表明借助多個性狀可鑒定蘿卜鏈格孢,但是由于鏈格孢屬內(nèi)不同種之間培養(yǎng)性狀不穩(wěn)定,且高度相似和重疊,實際操作中用傳統(tǒng)方法很難鑒定到種的水平。郭京澤等探索了鏈格孢屬中間顯著差異性狀對區(qū)分種和種間內(nèi)株系的作用,并且分析了這些性狀的穩(wěn)定性,認(rèn)定鏈格孢屬的分類應(yīng)選擇更多的分類性狀,在分類單元的描述方法上應(yīng)該是差異顯著性狀的集合體。王風(fēng)敏等針對北方春夏兩季對病原菌進(jìn)行分類,結(jié)果表明在不同時期侵染大白菜的黑斑病病原菌不同,春季大白菜黑斑病由甘藍(lán)鏈格孢引起,而進(jìn)入秋季則由蕓薹鏈格孢引起,原因可能為夏秋兩季溫度不同,夏大白菜與秋大白菜交叉期的存在,延長了黑斑病的侵染。近年來對真菌的5.8S rDNA 及其側(cè)翼的內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)進(jìn)行測序,根據(jù)遺傳背景進(jìn)行真菌系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定研究,成為國際上廣泛使用的技術(shù)。通過研究真菌核的染色體序列可分析不同株系的毒力變異和起源關(guān)系,為種的鑒定提供分類方面的證據(jù)。Jasalavich 等對十字花科蔬菜有致病性的鏈格孢rDNA 部分序列進(jìn)行了分析比較,表明蕓薹鏈格孢、甘藍(lán)鏈格孢、蘿卜鏈格孢等病原菌ITS1 和ITS2區(qū)包含較多變異,ITS1 比ITS2 有更大的序列變異,ITS1 序列長度變異大于ITS2 區(qū),每一種的序列長度均不同,ITS1 區(qū)的堿基構(gòu)成變異比ITS2 區(qū)更大,在種的水平上的變異主要在ITS1 區(qū),而屬的水平上的變異主要在ITS2 區(qū)。并提出可以根據(jù)ITS1 區(qū)的變異設(shè)計種轉(zhuǎn)化性探針和引物實現(xiàn)對植物材料上或純培養(yǎng)的鏈格孢的種的鑒別。肖長坤等在對十字花科蔬菜黑斑病菌3 個種及相近種的5.8S rDNA 和其側(cè)翼ITS 區(qū)進(jìn)行測序的基礎(chǔ)上,分別設(shè)計合成了鑒定白菜黑斑病菌3 個種的特異性引物。PCR 擴(kuò)增結(jié)果表明:A bre1 和Abre2 引物對能特異性擴(kuò)增蕓苔鏈格孢(A.brassicae)371bp 的片段,A bra1 和A bra2 引物對能特異性擴(kuò)增甘藍(lán)鏈格孢(A.brassicicola) 457bp 的片段,A jap1和A jap2 引物對能特異性擴(kuò)增蘿卜鏈格孢(A.japonica) 411bp 的片段,而且其他近源種未擴(kuò)增出目標(biāo)片段,說明這3 個引物對可以作為十字花科蔬菜黑斑病菌3 個種快速檢測鑒定的分子特征標(biāo)記。
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