1.1基因型對再生的影響
不同基因型的黃瓜材料,在誘導(dǎo)愈傷、不定芽和生根等方面均有顯著差異。 [2]以 85個基因型的子葉外植體為材料,在相同的誘芽培養(yǎng)基上僅有 28個基因型的外植體有不定芽發(fā)生;杜[3]發(fā)現(xiàn)在 12個黃瓜品種之間,不定芽誘導(dǎo)率最高可達 73%,最低只有 25%; [4]以東北地區(qū) 4個黃瓜主栽品種為材料,發(fā)現(xiàn)不定芽的誘導(dǎo)率顯著不同; [5]研究表明,不同基因型黃瓜的子葉節(jié)的再生芽數(shù)明顯不同。[6]進行了黃瓜子葉誘導(dǎo)不定芽的研究,發(fā)現(xiàn) 6-BA和 ABA搭配時,出芽率達 86.1%; [7]發(fā)現(xiàn), NAA誘導(dǎo)的愈傷比 2,4-D誘導(dǎo)的愈傷容易分化出芽點,在 MS附加 BA 2.0 mg/L、NAA 0.3 mg/L和 GA3 0.25 mg/L的培養(yǎng)基中芽分化率可達 64%; [8]指出極低濃度的 NAA能誘導(dǎo)出大量愈傷組織;但也有學(xué)者持相反意見,認為 NAA不利于黃瓜材料 c-8的子葉再生,而 IAA能較好地促進其再生。除此之外,也有關(guān)于其他激素能促進再生的報道。 [9]等優(yōu)化了 TDZ和 IBA的組合濃度,發(fā)現(xiàn)在 0.005 mg/L TDZ+0.05 mg/L IBA的培養(yǎng)基中,不定芽的誘導(dǎo)率達到 93.3%; [10]認為魯黃瓜 9號的最佳誘芽培養(yǎng)基為 MS+0.06 mg/L TDZ。
1.2激素組合對再生的影響
外源激素的種類及濃度對黃瓜不定芽的誘導(dǎo)和生長具有重要作用;蛐筒煌,對激素種類和相互配比的要求也不盡相同。從相關(guān)的報道看,黃瓜組織培養(yǎng)中較常用的激素有 6-BA、NAA和 IAA,近年來也有 TDZ能快速誘導(dǎo)芽分化的文獻報道。
1.3外植體類型與苗齡對再生的影響
(1)組織培養(yǎng)中外植體的種類對不定芽的再生影響很大。在黃瓜組織培養(yǎng)中使用的外植體類型有子葉、下胚軸、原生質(zhì)體、真葉、莖尖、葉柄、花藥、未受精的子房等。
(2)以往大多采用子葉作為誘芽外植體,近年來的研究則趨向認為子葉節(jié)是誘導(dǎo)率最高的外植體。另外也有用真葉、莖尖等作為外植體進行誘芽的研究。此外,人們對黃瓜原生質(zhì)體的分離和再生也進行了研究。
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